Navegando por Autor "SILVA, Diehgo Tuloza da"

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Acesso aberto (Open Access)
Genetic diversity and structure of Oenocarpus mapora germplasm conserved at eastern Amazon
(Universidade Federal do Pará, 2015-12) MOURA, Elisa Ferreira; OLIVEIRA, Maria do Socorro Padilha de; SILVA, Diehgo Tuloza da; PONTES, Lígia Cristine Gonçalves
O estudo teve como objetivo avaliar a diversidade e a estruturação genética em germoplasma de Oenocarpus mapora conservado na Amazônia Oriental. Para isso, foram genotipados com cinco locos microssatélites 88 indivíduos pertencentes a 24 acessos conservados no Banco Ativo de Germoplasma (BAG) da Embrapa Amazônia Oriental e coletados em oito locais distintos de três estados da Amazônia brasileira. Todos os locos foram polimórficos, gerando 85 alelos e média de 17 alelos por loco. A diversidade genética total (HE) foi de 0,48. As áreas de coleta foram consideradas geneticamente distintas, com ?p = 0,354. A análise de variância molecular (AMOVA) identificou que a porção de variação genética entre as áreas foi de 36,14%, e dentro, de 63,86%. As distâncias de Nei variaram de 0,091, entre as áreas de coleta de Abaetetuba e Santo Antônio do Tauá, no Estado do Pará, a 4,18, entre as áreas de coleta de Parintins, no Amazonas e Rio Branco, no Acre. Estudo por meio de abordagem bayesiana identificou a existência de nove populações que compõem as amostras do BAG analisado, com diferentes distribuições entre as amostras. O estudo mostrou alta taxa de endogamia por área de coleta, indicando que pode haver significativas taxas de autofecundação ou cruzamento aparentado nessa espécie, sugerindo que as coletas de amostras devam ser feitas de diferentes plantas nas populações naturais. Mesmo assim, foi identificado que há considerável variação genética no germoplasma de O. mapora avaliado.
Acesso aberto (Open Access)
Identification of duplicates of cassava accessions sampled on the North Region of Brazil using microsatellite markers
(Instituto Nacional de Pesquisas da Amazônia, 2013-12) MOURA, Elisa Ferreira; FARIAS NETO, João Tomé de; SAMPAIO, José Edson; SILVA, Diehgo Tuloza da; RAMALHO, Girena Fernandes
Duplicatas costumam ocorrer em bancos de germoplasma e a sua identificação é necessária para facilitar o manejo dos bancos ativos de germoplasma (BAGs) e diminuir custos de manutenção. O objetivo deste trabalho foi identificar duplicatas de mandioca determinadas previamente pela caracterização morfo-agronômica, em um BAG da Amazônia Oriental. Foram selecionados 36 acessos que se agrupavam em 13 grupos de similaridade morfo-agronômica para serem genotipados com 15 locos microssatélites. Todos os locos foram polimórficos, sendo obtidos 75 alelos, com média de cinco alelos por loco e HE = 0,66. Foram encontrados 34 pares de genótipos que apresentaram perfis multilocos idênticos e a probabilidade de identidade genética foi de 1,1x10-12 com probabilidade de exclusão de 99,9999%. Entre essas duplicatas, estão materiais coletados em épocas e locais diferentes, e com diferentes denominações e acessos com o mesmo nome coletados em diferentes locais e anos. O estudo identificou genótipos que vem sendo cultivados em diferentes locais e que vêm sendo mantidos pelos agricultores ao longo dos anos.
Acesso aberto (Open Access)
Proteína PR-4 de pimenteira-do-reino (piper nigrum l.): expressão heteróloga em sistema bacteriano e avaliação funcional
(Universidade Federal do Pará, 2015-02-06) SILVA, Diehgo Tuloza da; SOUZA, Cláudia Regina Batista de; http://lattes.cnpq.br/3633972375952822
Proteínas Relacionadas à Patogênese (PR) são induzidas em resposta ao ataque de patôgenos. Proteínas PR são agrupadas em 17 famílias, PR-1 a PR-17. Atividades antifúngicas e enzimáticas foram descritas para algumas dessas proteínas. Entre elas, a família PR-4 compõe as classes I e II de quitinases de plantas. Um clone de cDNA que codifica uma PR-4 da classe II, nomeada PnPR-4, foi isolado, em estudos anteriores, de Piper nigrum L. (pimenteira do reino). Esta é uma importante cultura para Brasil, principalmente no estado do Pará, no entanto sua produção tem diminuído devido à doença conhecida como podridão da raiz (Fusariose) causada pelo fungo Fusarium solani f. sp. Piperis. Neste trabalho, o cDNA da PnPR-4 foi usado para a produção da proteína recombinante, chamada de PnPR-4. O quadro de leitura aberta (ORF) da PnPR-4, foi amplificado por meio de ensaio de PCR e, em seguida a ORF foi ligada ao vetor de expressão pET-29(a) e introduzido, por eletroporação, em E. coli Rosetta (DE3). Nas células transformadas, a produção da proteína de interesse foi induzida por IPTG 1mM à 37°C por 5h. Após a produção, a atividade enzimática da proteina recombinante PnPR-4 foi avaliada pela detecção da atividade enzimática de quitinase em gel de poliacrilamida após eletroforese. A atividade foi avaliada em pH: 5.0 e pH:7.8 para demonstra a estabilidade da proteína recombinante. A massa molecular da PnPR-4 foi de 13.5 kDa, estando de acordo com outras PR-4 produzidas pelo sistema de expressão heterologa em sistema bacteriano. No ensaio de atividade enzimática, a PnPR-4 apresentou atividade quitinolitica, tanto em pH:5.0 ou pH:7.8. Esta é uma característica de chitinases de plantas, atividade em uma ampla faixa de pHs. Onde, a atividade ótima ocorre entre pH: 3.0 e 5.0. Na proteína recombianante, o pH ótimo foi 5.0, no entato ela teve atividade em pH 7.8, demonstrando a estabilidade da enzima. Estes resultados mostram que o sistema bacteriano de expressão heteróloga é eficaz para a produção da proteína recombinante PnPR-4, que é uma enzima com atividade quitinolitica e altamente estável. Assim, a PnPR-4 é uma nova enzima que pode ser usado em biotecnologia vegetal no combate contra fungos patogênicos da planta.