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Acesso aberto (Open Access)
Discriminação alélica do fator V da coagulação por PCR em tempo real: diagnóstico simples e preciso
(2009-03) OLIVEIRA FILHO, Aldemir Branco de; CAMPOS, Júlia Furtado; LIMA, Magaly do Bom Parto Lopes Vieira; MELO, Fárida Coeli de Barros Correia; NEVES, Washington Batista das; MELO, Raul Antônio Morais; LEMOS, José Alexandre Rodrigues de
Dentre as doenças cardiovasculares, a trombose venosa (TV) destaca-se pela associação entre fatores de riscos adquiridos e fatores genéticos. A resistência hereditária à proteína C ativada tem sido identificada como a principal causa dos casos de trombose venosa, sendo frequentemente associada à mutação fator V Leiden (G1694A). Em indivíduos homozigotos, o risco de trombose venosa é 50 a 100 vezes maior que em pacientes homozigotos normais, enquanto em pacientes heterozigotos o risco é de 5 a 10 vezes. Baseado na necessidade de avaliação e acompanhamento de pacientes com casos de trombose venosa e prevenção de seus respectivos familiares, foi desenvolvido um método simples de discriminação alélica do fator V da coagulação utilizando PCR em tempo real. Foram selecionados 67 pacientes com histórico de TV e 51 indivíduos sem histórico de TV. Primeiramente, a discriminação alélica do fator V foi realizada através de PCR convencional seguida de digestão enzimática (Mnl). Posteriormente, o diagnóstico foi realizado por PCR em tempo real. Ambos os métodos foram baseados no polimorfismo G1691A, sendo no segundo utilizado fluoróforos VIC e FAM para marcar os nucleotídeos G e A, respectivamente. A técnica de PCR-RFLP foi utilizada para diagnosticar 95 indivíduos homozigotos normais, 21 heterozigotos e 2 homozigotos FVL. Utilizando PCR em tempo real foram obtidos os mesmos resultados. A máxima similaridade entre os resultados obtidos por PCR em tempo real e PCR-RFLP indicou precisão significativa do novo método de discriminação e visualização alélica do fator V.
Acesso aberto (Open Access)
Increased risk of venous thrombosis by AB alleles of the ABO blood group and Factor V Leiden in a Brazilian population
(2009) LIMA, Magaly do Bom Parto Lopes Vieira; OLIVEIRA FILHO, Aldemir Branco de; CAMPOS, Júlia Furtado; MELO, Fárida Coeli de Barros Correia; NEVES, Washington Batista das; MELO, Raul Antônio Morais; LEMOS, José Alexandre Rodrigues de