Papel do sistema nitrérgico em respostas tipo ansiedade decorrentes de estresse agudo por substância de alarme coespecífica em zebrafish (Danio rerio, Hamilton, 1822)

Um dos diversos sistemas que participam da modulação de respostas de ansiedade é o sistema nitrérgico, que parece fundamental para que a sinalização por diversos neurotransmissores seja efetiva em possibilitar os ajustes comportamentais e fisiológicos observados em modelos relevantes para a psiquiatria biológica. Assim, com base na necessidade básica de entender os mecanismos proximais subjacentes a respostas relacionadas à ansiedade, o presente trabalho objetivou avaliar a participação do sistema nitrérgico em respostas tipo ansiedade decorrentes de exposição aguda à substância de alarme co-específica (CAS) em zebrafish. Para isso, 135 peixes da espécie Danio rerio (Hamilton, 1822) adultos foram utilizados. Destes, 39 foram doadores de CAS, enquanto 72 foram subdivididos em grupos de 12 animais com diferentes especificações experimentais para a avaliação de variáveis comportamentais e bioquímicas, e 24 foram utilizados para a análise histoquímica. Os animais foram tratados com 7-NI (10 ou 30 mg/kg), uma droga inibidora da enzima óxido nítrico sintase 1 (NOS-1), ou veículo. Após a administração da droga, foram individualmente expostos à CAS ou à água destilada (AD). Em seguida, foram submetidos ao teste de distribuição vertical eliciada pela novidade (DVEN) e, posteriormente, ao teste de preferência claro-escuro (PCE). Após a realização dos testes, os encéfalos dos animais foram dissecados para a quantificação dos níveis de nitrito e de espécies reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARs) por espectrofotometria. Para o experimento de histoquímica, grupos de 6 animais foram expostos à CAS ou à água destilada e, em seguida, submetidos à dissecação para a realização de cortes histológicos e marcações histoquímicas. Como resultados, o bloqueio de NOS-1 por ambas as doses de 7-NI parece ter produzido um maior estado de respostas tipo ansiedade tanto nos animais expostos à AD quanto naqueles expostos à CAS, sendo a dose de 10 mg/kg responsável por um estado intermediário entre o controle e o efeito observado com a dose de 30 mg/kg. Bioquimicamente, a inibição de NOS-1 parece ter exercido efeito antagônico para as diferentes doses de 7-NI sobre as concentrações de nitrito e de TBARs, a diminuição nos níveis de nitrito com a menor dose de 10 mg/kg parece estar associada ao aumento nas concentrações de TBARs, enquanto o aumento nos níveis de nitrito com a dose de 30 mg/kg esteve associado à diminuição das concentrações de TBARs. Quanto à histoquímica, a exposição à CAS leva a uma maior atividade nitrérgica no telencéfalo dorsomedial, telencéfalo supracomissural, área pré-óptica, telencéfalo pós-comissural, habenulas dorsal e ventral, grísea central, e rafe superior, enquanto menor atividade é observada no telencéfalo dorsolateral e teto óptico. No geral, a isoforma NOS-1 parece viabilizar a produção de NO responsável por modular respostas tipo ansiedade frente ao estresse agudo por CAS em zebrafish, e isso inclui diferentes ajustes comportamentais e bioquímicos, sejam eles direcionados à ansiogênese ou à ansiólise. Além disso, a exposição à CAS leva à alteração dos padrões de atividade em regiões encefálicas associadas a circuitos de defesa, sendo marcada, funcionalmente, pelo aumento da centralidade do locus coeruleus associado à diminuição da centralidade da rafe. Nesse sentido, estudos posteriores devem investigar o impacto de possíveis ações tônicas e fásicas da sinalização nitrérgica sobre respostas de defesa, bem como a influência do sexo, da relevância da ameaça, da controlabilidade do estresse, da duração do estresse e do contexto social nessas respostas em zebrafish.