Taxonomia integrativa de nematódeos Oswaldocruzia (Trichostrongyloidea: Molineidae) da Amazônia Oriental

Oswaldocruzia é um gênero de nematódeos parasitos de anfíbios (Anura, Caudata) e répteis (Squamata), representado por cerca de 90 espécies distribuídas mundialmente, das quais 43 ocorrem na região Neotropical. As espécies de Oswaldocruzia são caracterizadas principalmente pela morfologia espicular dos machos e são divididas em cinco grupos biogeográficos (Oriental-Etíope, Neo-etíope, Holártico, Neotropical Caribenho e Neotropical Continental) e, também, em três tipos morfológicos de bolsa copuladora (tipos I, II e III). Porém, a similaridade morfológica, a ausência de chaves de identificação atualizadas e de dados moleculares dificulta a sistemática do gênero. Assim, este estudo teve como objetivo, a realização da taxonomia integrada de nove espécies de Oswaldocruzia parasitos de oito espécies de anfíbios e uma espécie de réptil oriundos de diferentes coletas realizadas em três localidades no estado do Pará. Os hospedeiros foram necropsiados e os helmintos encontrados foram limpos, fixados e armazenados em etanol 70%. Para o estudo morfológico, os espécimes foram destinados à observação por microscopia de luz e microscopia eletrônica de varredura. Para o estudo molecular, realizamos a extração, amplificação e sequenciamento da região codificadora da enzima Citocromo c Oxidase Subunidade I do DNA mitocondrial. As sequências resultantes foram alinhadas e comparadas com dez sequências disponíveis publicamente no GenBank e duas reconstruções filogenéticas foram realizadas para observar as relações de parentesco, uma sob o critério de Máxima Verossimilhança e outra por Inferência Bayesiana. Como resultados identificamos Oswaldocruzia belenensis em Rhinella marina e Rhinella margaritifera, Oswaldocruzia chabaudi em Boana geographica e Boana wavrini, Oswaldocruzia chambrieri em Amazophrynella bokermanni e R. margaritifera, Oswaldocruzia lanfrediae em Leptodactylus paraensis, Oswaldocruzia vitti em Anolis fuscuauratus, Oswaldocruzia sp. nov. 1 em Phyllomedusa vaillantii e Oswaldocruzia sp. nov. 2 em Osteocephalus oophagus. O alinhamento e comparação dos níveis de divergência demonstraram diferenças significativas entre as novas sequências obtidas e as sequências do GenBank. Ambas as reconstruções filogenéticas demonstraram dois clados principais, um incluindo as sequências do México e outro clado geneticamente distinto da Amazônia, destacando a ocorrência de O. chabaudi em B. wavrini e B. geographica, a relação próxima entre as sequências de parasitos de Bufonidae e novas registros de hospedeiros e localidades para O. chambrieri e O. belenensis. Este estudo adiciona informações acerca da diversidade de helmintos parasitos de anfíbios e répteis da Amazônia, e demonstra que a combinação dos métodos morfológicos e moleculares apresentam potencial satisfatório para delimitação de espécies e caracterização do gênero.